Sephadex - Sephadex

Sephadex es un reticulado de dextrano gel utilizado para la filtración en gel . Fue lanzado por Pharmacia en 1959, después del trabajo de desarrollo de Jerker Porath y Per Flodin . El nombre se deriva de SE paration Pha rmacia dex tran. Normalmente se fabrica en forma de perlas y se usa más comúnmente para columnas de filtración en gel . Variando el grado de reticulación, se pueden alterar las propiedades de fraccionamiento del gel.

Estos medios cromatográficos y de filtración en gel altamente especializados están compuestos de perlas macroscópicas derivadas sintéticamente del polisacárido dextrano. Las cadenas orgánicas están reticuladas para dar una red tridimensional que tiene grupos iónicos funcionales unidos por enlaces de éter a unidades de glucosa de las cadenas de polisacáridos.

Las formas disponibles incluyen intercambiadores de aniones y cationes, así como resinas de filtración en gel, con diversos grados de porosidad; los tamaños de las perlas se encuentran en rangos discretos entre 20 y 300 µm .

Sephadex también se utiliza para cromatografía de intercambio iónico.

Aplicaciones

Sephadex se utiliza para separar moléculas por peso molecular. Sephadex es una alternativa más rápida a la diálisis (desalado), que requiere un factor de dilución bajo (tan solo 1,4: 1), con recuperaciones de alta actividad. Sephadex también se utiliza para el intercambio de tampones y la eliminación de moléculas pequeñas durante la preparación de biomoléculas grandes, como anfolitos, detergentes, marcadores radiactivos o fluorescentes y fenol (durante la purificación del ADN).

Una forma especial hidroxipropilada de resina Sephadex, llamada Sephadex LH-20, se utiliza para la separación y purificación de pequeñas moléculas orgánicas como esteroides, terpenoides y lípidos. Un ejemplo de uso es la depuración del colesterol.

Fraccionamiento

Cromatografía de exclusión.

Rango de fraccionamiento de proteínas globulares y dextranos (Da).

Tipo de gel Rango de fraccionamiento
Globular

Proteínas

Dextranos
G-10 ≤700 ≤700
G-15 ≤1500 ≤1500
G-25 1000–5000 100–5.000
G-50 1500-30 000 500–10 000
G-75 3000–80 000 1000–50 000
G-75 SF 3000–70 000 1000–50 000
G-100 4000-150 000 1000-100 000
G-100 SF 4000–100 000 1000-100 000
G-150 5000–300 000 1000-150 000
G-150 SF 5000-150 000 1000-150 000
G-200 5000–600 000 1000-200 000
G-200 SF 5000–250 000 1000-200 000

Cromatografía de intercambio de iones.

Descripción Funcionalidad Tamaño de la perla (µ)
Sephadex-CM C-25 carboximetilo 40-120
Sephadex-CM C-50 carboximetilo 40-120
Sephadex-DEAE A-25 2- (dietilamino) etilo 40-120
Sephadex-DEAE A-50 2- (dietilamino) etilo 40-120
Sephadex-QAE A-25 aminoetilo cuaternario 40-120
Sephadex-QAE A-50 aminoetilo cuaternario 40-120
Sephadex-SP C-25 sulfopropilo 40-120
Sephadex-SP C-50 sulfopropilo 40-120

Ver también

Referencias